从古至今人类总是勇敢的探索未知的世界。年,伽利略将望远镜指向了天空,从此开创了天文学。而年,列文虎克用自己发明的显微镜为我们打开了新世界的大门。人类,毫无疑问是这颗蓝色星球的‘统治者’;截止目前,全球已经超过了77亿人口。但有时候“统治地位”又不是那么地牢靠,小小的新冠病毒就能让我们的生活乱了套。而在我们看不到的世界里,微生物的数目让你无法想象,光是一个人身上的微生物就有万亿个。今天我们就讲一下全球30多亿的女性一生中,大多数都会遇到的一个“天敌”—念珠菌。
真菌性阴道炎研究现状
近年来,由于广谱抗菌药物、化疗药物及免疫抑制剂的广泛使用,使真菌感染有逐渐增多的趋势,已经成为阴道感染的第二大病因,仅次于细菌性阴道炎。据不完全统计,每年由念珠菌引发的感染性/复发性念珠菌外阴阴道炎人数多达1.3亿[1]。
妇(产)科真菌感染主要表现为豆腐渣样白带、外阴红肿、阴道肿胀,严重时伴随尿频尿急等症状,不仅给患者造成严重的生理不适,而且造成心理障碍。更重要的是,真菌导致的妇科炎症具有反复发作的特征,严重减弱患者的治疗积极性。因此,对妇科炎症疾病病原菌种类进行及时鉴定,采用敏感性药物进行治疗,对妇科炎症疾病的治疗具有重要意义[2]。
念珠菌性阴道炎的发病机制
念珠菌属于隐球酵母科,是最常见的深部真菌以及皮肤黏膜浅部真菌之一。阴道黏膜真菌感染属于浅部真菌感染,念珠菌属也是真菌感染性阴道炎的主要致病菌[3,4]。念珠菌性阴道炎的发病机制较为复杂,当机体免疫力下降、滥用抗生素等引起阴道微生物菌群失调时,白念珠菌可通过一系列的毒力因子引起宿主感染。这些毒力因子包括念珠菌从酵母相向菌丝相的转变能力、细胞表面的粘附素和侵袭素的表达增加、生物膜的形成及形态转换、分泌水解酶的情况、炎症反应等。这些因素相互关联、构成复杂的念珠菌致病因子网络[5]。
念珠菌性阴道炎的临床常见检测方法
目前,阴道炎检测,往往是采用联检方式顺带检测是否存在真菌(多数是念珠菌)感染,如TCT检查、阴道微生态检测(干化学法和/或有形成分检测),此外还有直接镜检法、培养法、快速乳胶凝集法、真菌免疫荧光镜检等常见真菌检测方法,具体如下[6,7]:
1.TCT检查
TCT检查是液基薄层细胞检测的简称,采用液基薄层细胞检测系统检测宫颈细胞并进行细胞学分类诊断,同时借助于显微镜的形态学观察,普通镜检查看样本中是否存在菌丝或孢子(类似于直接镜检法),对真菌的检出率低,灵敏度低。
2.阴道微生态检测
阴道微生态检测(干化学法和/或有形成分检测)是目前细菌性阴道炎常见的检测方法。
?干化学法
利用干化学法检测样本中的乙酰氨基己糖苷酶(NAG)、脯氨酸氨基肽酶(PIP)等成分(非真菌特异性化学成分)。
?有形成分检查
对样本中的上皮细胞、白细胞、杂菌、菌丝/孢子/滴虫、红细胞等有形成分进行检测,根据结果可判别清洁度,提示临床常见的细菌性阴道炎、真菌性阴道炎及混合性阴道炎等。
3.镜检法
根据不同染色方法,制备相应的标本,在高倍显微镜下观察是否有真菌菌丝、假菌丝甚至真菌丝和孢子,表明存在念珠菌,其中如果发现大量假菌丝或真菌丝,表明感染有侵袭的可能性,应当积极干预治疗。
其中,真菌免疫荧光镜检法,利用荧光素与真菌细胞壁上的葡聚糖、半乳甘露聚糖、几丁质、纤维素等多糖组分结合显微镜特定激发光波长下(在其中或覆盖-nm),使与结合上荧光素的细胞壁呈明亮的蓝(青)绿色荧光。
真菌免疫荧光镜检结果与普通镜检结果对比如下:
真菌普通镜检结果
真菌免疫荧光镜检结果
4.乳胶凝集法
乳胶凝集法通过检测真菌的抗原性,对具有特异性抗体的真菌进行直接测定,但对真菌的数量有要求,凝集法需要的真菌数量为1×/mL;若真菌数量较少,需要培养一段时间才可以检测[4]。
5.培养法
培养法在临床对各种微生物的检测中应用广泛,其通过显色培养基作为检测指标,并且能够通过菌株的形态及色泽等信息对菌株类型进行初步判定。但是这种检测方法所需时间较长,对于数量较少的真菌需要培养48h左右,才能够得到阳性结果[6]。
综上所述,在诸多检查方法中,真菌免疫荧光镜检法,具有快速、准确、灵敏,检出率高的优点,可以区分念珠菌定植与感染,而且灵敏度和阳性率均高于其他常见真菌性阴道炎的检测方法。“形态学”和“荧光光学”,不仅可以快速判断阴道分泌物等样本中有无真菌存在,还可通过孢子/菌丝的数量在某种程度上区分真菌性阴道炎的严重程度。
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参考文献/链接
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[1]BongominF.etal,Globalandmulti-nationalprevalenceoffungaldiseases-estimateprecision,JofFungi.
[2]叶佳铭.不同检测方法诊断妇科炎症真菌感染的对比研究[J].中国妇幼保健(24).
[3]PaivaLC,VidigalPG,DonattiL,etal.AssessmentofinvitrobiofilmformationbyCandidaspeciesisolatesfromvulvovaginalcandidiasisandultrastructuralcharacteristics[J].Micron,,43(2-3):-.
[4]谭荣芬.假丝酵母菌性阴道炎的病原菌分布及耐药性分析[J].中华全科医学,,12(2):,
[5]张思思,夏维婷,周志阳,徐欣欣,吴雪清.念珠菌性阴道炎发病机制及耐药机制的研究进展[J].中华全科医学.,15(11):,
[6]赵磊,殷舟,叶佳铭.不同检测方法诊断妇科炎症真菌感染的对比研究[J].中国妇幼保健.年12月第34卷第24期.
[7]姜楠,刘冰,何芋荣,漆谦,李彦霖.阴道分泌物真菌感染5种检测方法比较[J].国际检验医学杂志.年6月第38卷第12期.
杭州缔蓝生物技术有限公司(简称“缔蓝生物”)成立于年,是一家致力于体外诊断试剂产品的自主研发、生产、市场学术推广、销售和服务的企业,是国内唯一专注于开发真菌分子诊断产品的企业。目前开发的产品包括真菌核酸检测试剂盒系列、真菌核酸提取和纯化试剂盒系列、真菌免疫荧光染色液系列等体外诊断试剂产品,拥有3项发明专利。公司立足于创立和弘扬自主优质品牌,始终坚持着以质量取胜的策略,为客户提供安全、有效、精确和稳定的体外诊断试剂产品,广泛寻求国内外企业和科研院所、医疗机构的合作研究和开发,引进新技术、新概念和新产品。
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