经常地诧异很多人考职称屡战屡败，学习方法仅仅是要么囫囵吞枣地学习视频课件，要么不断地做题库。我顺利地通过了检验士/师、主管技师、副主任技师考试，没有觉得很困难。很多人宁可迷恋于手机种种娱乐，也无法让自己能够静下心来用一个月的时间努力冲刺。

其实没有什么特殊的学习技巧，无非是把书本的每个角角落落的知识都汇总牢记于心，努力运用各种技巧记忆，比如理解记忆法、绕口令记忆法、题库正确答案记忆、多练习案例题等。以下是我对照“应试指导及历年考点串讲”所作的复习内容，供同仁取用，希望能有所帮助。

医学检验系列职称考试

——结构性板块学习记忆技巧

一、（汇总法、比较法、理解记忆法、重点内容划线记忆法；习题正确答案记忆法；难记内容绕口令记忆法）

血液生理

1.1血液组成成分4个：红细胞、白细胞、血小板、血浆（血细胞+血浆）

1.2血浆比血清多某些凝血因子：I、II、V、VIII等（I是纤维蛋白原；II是凝血酶原）

1.3血浆定义：血液抗凝离心后除去细胞成分

1.4血清定义：血液离体自然凝固而分离出的淡黄色液体

1.5血浆用途：化学成分的测定、血栓与止血检查

1.6血清用途：临床化学、临床免疫学检查

**拓展内容

I：纤维蛋白原；II：凝血酶原；III：组织因子；IV：钙离子；

V：易变因子；VII：前转变素；

VIII：抗血友病因子；IX：血浆凝血激酶成分；XI：血浆凝血激酶前质（8、9、11甲乙丙）

X：stuart因子；XII：接触因子；XIII：纤维蛋白稳定因子；HK：高分子量激肽原；PK：激肽释放酶原

2.血液理化

2.1血量4-5L（体重6-8%）,血细胞45%、血浆55%

2.2男女比较谁血多：正常男的多、女人妊娠期才多（25%）

2.3动脉血鲜红色、静脉血暗红色

2.4PH7.35-7.45

2.5比重末尾两位数有规律（尾数减半/累加）

2.5.1全血：1.-1.

2.5.2血浆：1.-1.

2.5.3血细胞：1.

2.5.4血浆渗透压：-mmol/LmOsm/(kg.H2O)±10

2.5.5拓展内容

淡红色：贫血

乳糜血：脂血

樱桃红:一氧化碳中毒（碳氧血红蛋白）

棕色或黑色血液：亚硝酸盐中毒（三价铁血红蛋白）

3.血液特性

3.1红细胞悬浮稳定性、粘滞性、凝固性

3.2悬浮稳定性：RBC表面的唾液酸根负电荷、血浆成分/血浆粘度、血流动力学相关。

3.3粘滞性：与血细胞比容、血浆粘度、I因子、球蛋白等相关

3.4全血粘度=4-5倍NS

血浆粘度=1.6倍NS

4.血液生理功能

4.1四大功能：运输、协调、内环境稳定、防御功能

4.2哪些内环境稳定：水电解质平衡、酸碱平衡、体温恒定。

4.3血液标本的采集

4.3.1两种采血方法：静脉采血法、皮肤采血法

4.3.2静脉采血法两种：普通静脉采血法、真空采血法

4.3.3采血部位：

4.3.3.1成年人：肘部静脉、手背静脉、内踝静脉、股静脉

4.3.3.2儿童：+颈外静脉（危险、少用）

4.3.3.4真空采血法（负压采血法）两种装置：套筒式、头皮静脉式

4.3.3.5真空采血系统组成3要素：采血管、针头、软导管/针筒

4.3.3.6真空采血系统7优点：自动定量、全封闭、无须血样转移、减少标本溶血/污染、有效保护血液有形成分、结果可靠、不同色码用于不同项目。

4.4皮肤采血法（毛细血管采血法）

4.4.1采血部位：手指、耳垂

4.4.2皮肤采血血液来源：微动脉、微静脉、毛细血管，含有细胞内液、细胞间质

4.4.3WHO推荐“血常规”采血部位：左手无名指指端内侧

4.4.4婴幼儿采血部位：+??指、足跟内外侧均可

4.4.5严重烧伤患者：皮肤完整部位

4.6方法学评价：

4.6.1皮肤采血优点：简便、快速、经济：缺点：溶血、凝血、混入组织液

4.6.2静脉采血优点：

4.6.2.1普通静脉采血优点：价格低；缺点：操作烦、难规范、易污染

4.6.2.2真空采血法：规范、利于样本收运存、防院感；缺点：贵

4.7质控：生理状态和饮食影响、操作影响、其他影响

4.8抗凝剂

4.8.1常用抗凝剂6种：EDTA盐、肝素、草酸盐/双草酸盐、枸橼酸盐、氟化钠、物理抗凝

4.8.2抗凝定义：用物理或化学方法除去或抑制血液中某些凝血因子的活性，阻止血液凝固。

4.8.3与钙离子形成螯合物的是：EDTA盐、枸橼酸盐

4.8.4与钙离子形成草酸钙沉淀的是：草酸盐/双草酸盐

4.8.5ICSH（国际血液血标准化委员会）建议血细胞计数抗凝剂是EDTA-K2，用量1.5-2.2mg/ml血液

4.8.6肝素抗凝原理：阻止凝血酶的形成和血小板聚集，用量15+-2.5IU/ml，用于RBC脆性

4.8.6.1肝素抗凝优点：不影响血细胞体积、不易溶血

4.8.6.2肝素抗凝缺点：会引起白细胞聚集、罗氏染色背景蓝色、不适于全血细胞计数CDC、不适于细胞形态学检查

4.8.7草酸盐抗凝比例是1：9（抗凝剂：血液），**不适用于凝血检查**

4.8.8双草酸盐不适用于血小板计数、不适用于白细胞分类

4.8.9枸橼酸盐抗凝比例是1：9（凝血检查）、1：4（红细胞沉降率）

4.8.9物理抗凝是用玻璃珠去掉纤维蛋白

4.8.10EDTA抗凝剂缺点：会有血小板聚集、卫星现象、不适合凝血检查、不适合血小板功能

4.8.11枸橼酸钠用于：红细胞沉降率、凝血试验、输血保养液

4.8.12肝素用于：血气分析、红细胞渗透脆性

4.8.13EDTA.K2用于血细胞计数

4.9血涂片制备

4.9.1载玻片：清洁、中性、干燥、无油腻

4.9.2新载玻片的清洗：1mol/LHCl浸泡24h，清水冲洗。（原因：新玻片含有游离碱质）

4.9.3制备方法3种：手工推片、仪器自动推片、有核细胞层推片（抗凝标本，棕黄层涂片）

4.9.3.1手工推片法分两种：薄血膜法、厚血膜法

4.9.3.2厚血膜法用于：微丝蚴检查、疟原虫（也用厚薄血膜同片法）

4.9.3.3影响涂片厚薄的因素有4个：血滴大小、推片角度、推片速度、血细胞比积

4.9.3.4良好血片标准5个：细胞分布均匀、头体尾分明、两侧留空隙、边缘整齐、厚薄适宜。

4.9.3.5有核细胞层涂片法用于两种疾病：WBC减少时的分类、红斑狼疮胞（LE）检查

4.9.4质控

4.9.4.1器材玻片、制片要求见8.1、8.3.4

4.9.4.2染色：1小时内完成

4.9.4.3制片：

4.9.4.3.1血膜越厚原因：血滴大、角度大、推片快、比积高、粘度高

4.9.4.3.2高粘血：小血滴、小角度、慢推

4.9.4.3.3稀低粘血：大血滴、大角度、快推

4.9.5方法评价：

4.9.5.1手工推片法：用血少、操作简单、应用最广

4.9.5.2有核细胞层推片法：细胞灰白色层、棕黄色层阳性率高，但某些抗凝剂影响细胞形态见8.3.2

5.细胞染色

5.1瑞氏染液三种成分：碱性染料亚甲蓝、酸性染料伊红、甲醇（溶剂）**亚甲蓝=美兰**

伊红+美兰=伊红化美兰（PH中性）MEM+E-理解成NaCl格式

5.2瑞氏染色原理

5.2.1物理吸附作用、化学亲和作用

5.2.2各种细胞成分化学性质不同，与染料亲和力不同，所以染成不同颜色。

5.2.3染色影响因素5个：染液PH、细胞数量、血膜厚度、染色时间、染液浓度

5.2.4染色液最适PH是：PH6.4-6.8

5.2.5细胞蛋白质成分是两性电解质，所带电荷多少跟染色液PH有关（Pr-、Pr+）

5.2.6瑞氏染色正常环境颜色：（酸性物质染红色、碱性物质染蓝色）

5.2.6.1血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质；

5.2.6.2细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞质为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色或蓝色，称为嗜碱性物质；

5.2.6.3中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫红色，称为嗜中性物质

5.2.6.4原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质，染成较浓厚的蓝色；

5.2.6.5中幼红细胞既含酸性物质，又含碱性物质，染成红蓝色或灰红色；

5.2.6.6完全成熟红细胞，酸性物质彻底消失后，染粉红色。

5.2.7偏酸环境：蛋白质正电荷多，所以与酸性染料伊红容易结合（Pr-E-），RBC、嗜酸性颗粒染色偏红；细胞核淡蓝色或不着色**偏酸时偏红少蓝**

5.2.8偏碱环境：蛋白质负电荷多，所以易与碱性染料亚甲蓝结合(M+Pr-)，细胞核染灰蓝色；嗜酸性颗粒染暗褐色/棕黑色；中性颗粒偏粗染紫黑色

5.2.9拓展

5.2.9.1染料成分存在方式：氯化美兰（M+Cl-）、伊红化钠（Na+Y-）

5.2.9.2氯化美兰有色部分成分：美兰，呈碱性，所以叫碱性染料

5.2.9.3伊红化钠有色部分成分：伊红，呈酸性，所以叫酸性染料

5.2.9.4甲醇的作用：溶剂（产生美兰离子、伊红离子）、固定细胞（形态、增加表面积）

5.2.9.5染液试剂放长了，美兰部分转化成天青，天青愈多愈好

5.2.9.6等电点（PI）：PHPI，带正电荷；PHPI，蛋白质带负电荷

****PI的左为正电荷、右为负电荷****

5.3吉姆萨染色

5.3.1染液4个成分：天青、伊红、甲醇、纯甘油

5.3.2原理：同瑞氏染色原理

5.3.3要点：血片用甲醇固定3-5分钟

PBS缓冲液稀释吉姆萨染液10-20倍

浸染10-30分钟

5.4质控

5.4.1染色影响5个因素：细胞数量、血膜厚度、染色时间、染液浓度、PH

5.4.2染色过深：甲醇脱色、缩短染色时间、稀释染液、调节PH

5.4.3染色过浅：复染、延迟染色时间、调节PH

5.5方法评价

5.5.1最常用的血涂片染色方法：瑞氏染色法

5.5.2最好的染色方法：瑞氏-吉姆萨符合染色（质/颗粒、核/寄生虫均好）

5.5.3瑞氏染色优缺点：细胞质、中性颗粒染色效果好；细胞核、寄生虫染色差

5.5.4吉姆萨染色优缺点：细胞质染色差；细胞核、寄生虫染色好

5.5.5染疟原虫：吉姆萨染色法

二、

2.红细胞

2.1红细胞的生老病死（大约时间）：3天+2天+天（内3外7：3+7或3+2+5）

2.1.1骨髓内72小时：骨髓造血干细胞-原红-早幼红-中幼红-晚幼红-网织红（起始过程）

2.1.2骨髓外:

2.1.2.1网织红细胞-成熟红细胞：48小时

2.1.2.2成熟红细胞：天

2.1.3衰老红细胞主要死亡场所：脾

2.2网织红细胞（Ret）：是过渡细胞（晚幼红细胞脱核到成熟红细胞之间）

是未完全成熟的红细胞

胞质中残存嗜碱性核糖核酸RNA

活体染色后呈深染的颗粒状/网状结构（深染颗粒2个以上）

**活体染色染料：新亚甲蓝、黄焦油蓝、中性红等**

2.2.1拓展：网织红细胞是无核的红细胞，其中的颗粒或网状结构是嗜碱性的RNA

2.2.2拓展：红细胞生于骨髓造血干细胞、死于脾脏

2.3红细胞功能：携带气体、交换气体（Hb运输O2、CO2）

2.4血红蛋白（Hb）

2.4.1组成：珠蛋白肽链4条（两对）、血红素4个（每条肽链包裹1个血红素）

2.4.2四聚体

2.4.3血红素组成：铁、原卟啉

2.4.4血红素：也称为亚铁血红素、氧合血红蛋白

2.4.5亚铁：Fe2+（才能与O2结合）

2.4.6成人血红蛋白类型：HbA、HbF

2.4.6.1HbA：还原血红蛋白，99%，α2β2

2.4.6.2HbF：高铁血红蛋白,1%，α2γ2

2.4.7出生3个月后HbF降至1%以下

2.4.8分子量：

2.5红细胞计数

2.5.1原理两种：

2.5.1.1手工显微镜法：用等渗稀释液，稀释血液、充池、计数、换算

2.5.1.2血液分析仪法：电阻抗法/光散射法（和/或）

2.5.1.3拓展：10ul全血+2ml红细胞稀释液(10+,稀释倍数=/10=倍)

混匀

充池静置3-5分钟

高倍镜

计数5个中方格（中央大方格：正中1个+四角4个）

换算：N*5*10**=N*(/L)

公式说明：*5=25个中方格=1个大方格

*10=计数池每个大方格容积长*宽*高分别是1*1*0.1mm3换算成ul

*=*=L换算成ml、再换算成ul（1L=ml、1ml=ul）

*应改为=稀释倍数

附计数池图（特别说明mm3=ul）

2.5.2优缺点

2.5.2.1手工法：不需要特殊设备、复杂费时、CV11%以上

2.5.2.2仪器法：需要特殊设备、简单快速、CV2%

2.5.3手工法误差原因全过程：采样凝固、稀释不准、充池不规范、计数不准、吸管和计数池不准，尤其计数域误差（3种误差：技术误差、仪器误差、计数域误差）

2.5.3.1拓展：计数域误差也叫分布误差，每次充池细胞不可能完全分布相同造成的误差

2.5.3.2固有误差/系统误差：仪器误差+计数域误差

2.6参考值*/L

2.6.1女：3.5-5

2.6.2男：4-5.5

2.6.3新生儿：6-7

2.7医学决定水平：6.8需要治疗

2.8医学决定水平：3.5（女）、4（男）贫血

2.9医学决定水平：1.5输血

2.10临床意义3种情况：生理、贫血、增多

2.10.1生理变化：年龄、性别、精神、运动剧烈、气压减低、妊娠

2.10.2贫血：丢失过多、寿命缩短、原料不足、造血减退

2.RBC增多：原发性、继发性、相对性（相对性是指血容量少如烧伤）

3.血红蛋白

3.1测定方法7种：氰化高铁血红蛋白法（HiCN）

叠氮高铁血红蛋白法（HiN3）

十二烷基硫酸钠血红蛋白法（SDS法）

溴代十六烷基三甲胺法（CTAB法）

碱羟血红蛋白法（AHD法）

沙利氏酸化血红蛋白法（Sahli法）

血细胞分析仪法

3.2各方法特别之处

有剧毒氰化钾KCN的两个：HiCN、HiN3（HiN3毒性是HiCN的1/7）

ICSH公认的参考方法：HiCN

淘汰的方法：Sahli

准确度和精密度最差的方法：CTAB法、Sahli

血细胞分析仪通常使用的方法：SDS法

AHD法波长是nm，其它方法基本都在nm左右

HiCN毫摩尔消光系数44、摩尔吸光系数（倍）

SDS法没有毫摩尔消光系数

标准品：AHD法用氯化血红素、其它法都用HiCN参考品

不能转化的血红蛋白：硫化血红蛋白(SHb)

转化较慢的血红蛋白：HbCO

血红蛋白种类：氧合血红蛋白、碳氧血红蛋白、高铁血红蛋白及衍生物

质控品种类：ACD保养液抗凝全血、进口全血、醛化半固定RBC

剧毒废液处理：1：1加水稀释

加35ml/L次氯酸钠

混匀

15小时（使CN-转化成CO2+N2）后排入下水道

**不能接触酸**

HiCN转化液存放：棕色玻璃瓶（塑料瓶会丢失CN-）、4°保存（结冰会失效）

3.3HiCN法原理：除了SHb外，Hb被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白(Hi)，再与氰离子(CN)结合，生成稳定的棕红色的氰化高铁血红蛋白(HiCN)。HiCN最大吸收峰在nm处，在特定条件下毫摩尔吸光系数为(mmol·cm)，根据吸光度即可求出血红蛋白浓度(g／L)。

3.4HiCN法操作：20ul全血+5ml转化液、5分钟、nm波长、1cm比色杯光径、吸光度换算或者标准曲线/K值出结果。

计算公式：A*.7=A*/*

：血红蛋白分子量

：HiCN摩尔吸光系数

：稀释倍数=/20

3.5引起假高的因素：异常血浆蛋白如高球蛋白血症、脂血/脂滴、WBC超过30*/L、稀释不准、溶解不当、毛细血管血（偏高10-15%）

3.6临床意义

3.6.1生理性变化：年龄差别、日内差别（高峰期7点）

3.6.2贫血

**比RBC指标好**

但是特别主要2点：

大量失血变化慢、大RBC/小RBC低色素贫血时Hb与RBC不成比例（大高小低，RBC正常）

3.7参考值：成人女-g/L、男-g/L、新生儿-g/L

4.红细胞形态检查

4.1RBC正常形态：（瑞氏染色）

双凹圆盘形

大小一致

平均直径7.2μm(范围6-9.5)

淡粉红色

生理性淡染区（中央1/3）

胞质无异常结构

4.2临床意义

4.2.1有四种改变：大小、形状、血红蛋白含量、异常结构

大小改变4种：小红细胞（6）、大红细胞（10）、巨红细胞（15）、大小不均

形状改变10种：球椭靶口鏻裂棘有泪不整

血红蛋白含量改变5种：低色素性、正常色素性、高色素性、多色性、细胞着色不一

异常结构：寄生虫、卡波氏环、豪焦小体、嗜碱性点彩红细胞

4.2.2.1小红细胞见于：缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血、遗传性球形细胞增多症

4.2.2.2大红细胞见于：巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、恶性贫血

4.2.2.3巨红细胞见于：巨幼细胞性贫血

4.2.2.4RBC大小不均：重度增生性贫血（如巨幼细胞性贫血）

4.2.3正常色素性见于：正常人、急性失血、再障、白血病

4.2.4低色素性见于：缺铁贫、珠蛋白生成障碍性贫、铁粒幼细胞性贫、某些Hb病

（原料和障碍）

4.2.5多色性见于：正常人、骨髓造血活跃如溶血性/急性失血性贫血

4.2.6铁粒幼RBC性贫血：低色素性、正常色素性

4.2.7缺铁性贫血：小RBC；低色素性；椭圆形RBC

4.2.7小细胞低色素性RBC：缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血

4.2.8冠名“遗传性”：球形RBC、椭圆形RBC

4.2.8.1冠名“增多症”：球形RBC、椭圆形RBC、口形RBC

4.2.9正常人可见：小红细胞（罕见）；椭圆形RBC、口形RBC、裂RBC、有核RBC（新生儿）、泪滴形RBC；正常色素性、多色性；嗜碱性点彩（罕见）

**拓展：

巨幼细胞性贫血：大、巨、大小不均；高色素性、椭圆形RBC、裂RBC、RBC形态不整；豪焦小体、卡波氏环

4.2.10棘RBC见于：β脂蛋白缺乏症、脾切除、酒精中毒性肝病、尿毒症（白啤酒-尿急）

4.2.11点彩RBC见于：铅中毒、罕见正常人

4.2.12寄生虫见于：疟原虫、微丝蚴、杜氏利什曼原虫

2.13豪焦小体见于：脾切/脾无/脾缩/脾低、红白血病、巨幼贫

5.血细胞比容测定(Hct/PCV)

5.1方法6种：血液分析仪法、手工法（折射计法、黏度法、比重法、离心法、放射性核素法）

5.1.1手工推荐方法：离心法（微量法）

5.1.2手工离心法分两种：微量法、温氏法（Wintrobe法）

5.1.3ICSH推荐的参考方法：放射性核素法

5.1.4血细胞分析仪法：与MCV、RBC结果相关，HCT=MCV*RBC（脉冲平均体积*RBC数）

5.1.5离心法残留血浆：温氏法（结果偏高）、微量法（残留少，2%左右）

5.1.6精度比较：手工法2%、血液分析仪法1%

5.1.7血液分析仪法缺点：RBC增多症、血浆渗透压异常、MCV/RBC影响有误差

5.1.8手工法缺点：抗凝不准、混匀不佳、离心速度低、RBC形态异常/增多症时的血浆残留增加

**RBC增多症：手工法、血液分析仪法均会误差

5.2参考值：温氏法男0.4-0.54、女0.37-0.47；微量法男0.47、女0.42

5.3操作方法（比较记忆、注意点记忆）

5.3.1温氏法

2ml抗凝血（肝素/EDTA）加入温氏管

水平离心机离心30分钟（有效半径22.5cm、0r/min、g相对离心力RCF）；

分成五层（血浆层、血小板层、白细胞和有核红细胞层、还原红细胞层-紫黑色、氧合红细胞层-鲜红色）**注意从上而下的顺序**

结果判读：还原红细胞层-紫黑色高度mm*0.01=Hct

5.3.2微量法

抗凝的全血或者末梢血，加到一次性毛细玻璃管50mm处（2/3位置）、封口

水平毛细管离心机离心离心5分钟（00r/min、RCF≥0g）

专用读数板/刻度尺测量、计算。

****毛细玻璃管规格：75mm、内径0.8-1.0mm、壁厚0.20-0.25mm、含肝素2U****

****橡皮泥封口要求：管口底面平整、深入管内2mm左右******

****分层和读数层一致****

5.4临床意义：增高、减低、输液指标、计算RBC平均值

5.4.1增高：烧伤、呕吐、腹泻、手术、失血、RBC增多症（失水高、真性/继发RBC增多症）

5.4.2降低：贫血（贫血时Hct、Hb与RBC数减少不一致）

5.4.3输液指标：包括输血、输液

5.4.4计算2个关联平均值：MCV、MCHC

6.RBC平均指数：通过3个结果计算（RBC、Hb、Hct）

****其中Hct手工法是离心操作结果、血球仪是计算结果(MCV*RBC)****

6.1指标3个：MCV、MCH、MCHC

MCV：RBC平均体积体积用飞升fl、、=Hct/RBC*

MCH：RBC平均血红蛋白含量含量用皮克pg、、=Hb/RBC*

MCHC：RBC平均血红蛋白浓度浓度用g/L、=Hb/Hct***平均RBC，则分母都是RBC数；浓度用浓度单位模式g/L；涉及体积用Hct******

6.2影响因素：

影响Hb的因素：高脂血症、WBC增多症等都会影响MCV和HCHC假高(如下)

3.5引起假高的因素：异常血浆蛋白如高球蛋白血症、脂血/脂滴、WBC超过30*/L、稀释不准、溶解不当、毛细血管血（偏高10-15%）

**MCHC计算用Hb/Hct，因此受这两个指标影响因素的影响。Hct时的血浆残留、异常RBC**

MCV假高：RBC凝集如冷凝结、高血糖33.3mmol/L

6.3要求：同一标本检测出的3个基础数据Hct、Hb、RBC

**可用浮动均值法（XB分析法）进行质控**

6.4参考值：MCV80-fl

MCH27-34pg

MCHC-g/L

6.5临床意义

**MCHC增高见于球形细胞增多症、减低见于小细胞低色素性贫血疾病**

RBC体积分布宽度RDW

1两种表达方式RDW-CV、RDW-SD，多用CV

2影响因素：RBC碎片、RBC凝集、双相RBC（聚集、碎掉、大小两种）

3临床意义：

贫血形态血分类6种（小细胞、正常细胞、大细胞均一性；小细胞、正常细胞不均一性）

**依据RDW和MCV分类，RDW代表大小平均程度-愈小愈均一；MCV代表大小**

缺铁贫IDA诊疗指标（铁剂治疗有效时造血新的RBC体积大）

鉴别IDA和β珠蛋白障碍性贫血

****小细胞（MCV低）、不均一(RDW高)

小细胞均一：轻型地中海贫血（MCV低、RDW正常）

小细胞不均一：IDA（MCV低、RDW高）

正常细胞不均一：再障（MCV正常、RDW正常）

大细胞不均一：巨幼贫（MCV大、RDW高）

**小细胞低色素性贫血：IDA、轻型地贫

（区别在小细胞状态，IDA大小不等=RDW高、地贫大小均一=RDW正常）

网织RBC计数(Ret)

1操作方法：3种试管法、血球仪法、网织仪法、（增加：流式细胞仪）

1.1.1普通光学显微镜法：计数给RBC中的Ret（分两种方法：试管法、玻片法、）

（增加：Miller窥盘法）

****染料有亚甲蓝/新亚甲蓝、煌焦油蓝（灿烂甲酚兰）、中性红

****推荐用新亚甲蓝、Miller窥盘（手工法参考方法是试管法）

7.1.2血液分析仪法、网织细胞计数仪法：荧光染色RNA、流式细胞术（FCM）计数

****荧光染料：吖啶橙、派若宁-Y、噻唑橙

2血液分析仪法提供一些列参数，尤其3参数1指数：

HFR：高荧光强度网织红细胞

MFR：中

LFR：低

RMI：=(MFR+HFR)/LFR*（（高+中）/低*）

***H高、M中、L低；F荧光；RRet；

3显微镜计数使用Miller窥盘法可减少误差

4仪器法干扰因素（假高）：Howell-Jolly小体、有核红细胞、巨大血小板（误认）

5参考值：成人0.08-2%(25-75*/L

新生儿2-6%

6①Ⅰ型（丝球形）红细胞几乎被网织物充满，仅在正常骨髓；

②Ⅱ型（网型）红细胞中央线团样结构松散，存在于骨髓；

③Ⅲ（破网状）网状结构稀少成不规则点状，少量存在于外周血中；

④Ⅳ（点状型）嗜碱性物质少，呈分散的细颗粒状，主要存在于外周血中。

****从I-IV依次形态：密网、疏网、破网、颗粒状****

****骨髓中有I、II型，主要是II型

****外周血有III、IV型，主要是IV型

7临床意义

7.1判断RBC造血情况

7.2观察贫血疗效（疗效过程波动规律3、7、14天起效、高峰、下降）

7.3骨髓移植后监测

7.4Ret生成指数RPI=Ret%*被测Hct/正常人Hct*1/Rct成熟时间

****Ret因疾病导致的EPO增加而提前释放，会导致Hct偏高、Ret成熟时间延长，最终造成Ret%偏高，因此PRI结果较准确。

****RMI指Ret成熟度

****PRI是避免结果受疾病影响不准，是与正常人的比较值，结果较准确

8操作方法：2滴黄焦油蓝（10g/L）+2滴全血，染色20分钟，计算个RBC中Ret

9Miller窥盘计算:：A中计数RBC、B中计数Ret、B=9A（9倍关系、小A大B、B类似9）

Ret%=B中Ret/9*A中RBC*%

****RBC造血Ret增多见于溶血、失血、放疗/化疗后骨髓恢复（3种）

减少见于再障、溶贫再障危象

****绝对值15*/L：典型再障、骨髓移植失败

****外周血尚未成熟的RBC有：Ret、有核RBC

****骨髓中尚未成熟的RBC有：原红、早幼、中幼、晚幼、Ret

****拓展：再障诊断标准之一：Ret%0.5%、#15*/L

①全血细胞减少，网织红细胞绝对值减少。

②一般无脾肿大。

③一般抗贫血药物治疗无效。

④骨髓检查显示至少一部位增生减低或重度减低

（如增生活跃，巨核细胞应明显减少，骨髓小粒成分中应见非造血细胞增多）。

⑤除外其他引起全血细胞减少的疾病

如阵发性睡眠性血红蛋白尿、骨髓增生异常综合征中的难治性贫血、急性造血功能停滞、骨髓纤维化、急性白血病、恶性组织细胞病等。

9、点彩红细胞

9.1产生：未成熟RBC发育受损、胞质残存变性的嗜碱性RNA、染料是碱性亚甲蓝、大小/形状不一的蓝色颗粒；瑞氏染色后颗粒呈蓝黑色

****胞质中有嗜碱性RNA两种：Ret、点彩RBC

（区别是点彩RNA变性了、Ret没有变性）

9.2操作：1滴全血（甲醇固定3分钟）+染液（碱性亚甲蓝50g/L）2分钟，个RBC中点彩RBC比例

9.3参考值：0.03%

9.4增高的临床意义

9.4.1中毒：铅、汞、银、铋、硝基苯、苯胺

9.4.2贫血

10.RBC沉降率ESR=血沉

10.1分三期沉降：缗钱状形成期、快沉期、慢沉期（前两个期分别10分钟内、40分钟）

****快沉等速****

10.2方法：

手工法：魏氏法、潘氏法（潘氏法用于儿童，方法二者类似）

血沉仪法

沉降率(ZSR)(特制血沉管、r/min、正反旋转、每次45秒、度正/反转)

****推荐方法：魏氏法

****缗钱状主要原因：蛋白质比例、RBC形/数、血沉管位置、抗凝剂浓度、室温

****加快原因：RBC减少易形成缗钱状、RBC直径增加、血沉管倾斜、抗凝剂浓度低、室温25°c(缗钱状形成是主要原因)

10.3参考值：男0-15mm/h

女0-20mm/h

10.4操作：静脉血：抗凝剂=4：1

****ESR：4：1枸橼酸钠mmol/L长管浓度高

****血凝：9：1枸橼酸钠mmol/L短管浓度低

****拓展：1小时血浆层高度、血沉管内径2.5mm、避免光线/移动

10.5临床意义：

增快：生理性、病理性（炎症、组织损伤/坏死、恶性肿瘤、高球蛋白血症/高胆固醇血症）

***女、月经期、3个月以上孕期、老年人

减低：RBC增多症、肝病、肿瘤、继发纤溶

（待续，欢迎加