作者lJone
编辑l细胞房间
在年7月6-10号举行的27届国际血栓与止血学会（ISTH）会议上，BioMarin发布了其A型血友病基因疗法ValoctocogeneRoxaparvovec的一项1/2期临床试验3年更新结果和3期临床试验中期结果，并宣布基于这两项临床试验结果和与监管机构沟通情况，计划在第四季度向FDA和EMA提交上市许可申请。BioMarin有望成为第一家申请血友病基因疗法上市许可的公司。
ValoctocogeneRoxaparvovec
ValoctocogeneRoxaparvovec采用AAV5载体，为满足AAV的装配要求，BioMarin选择删除B结构域。删除B结构域后FⅧ基因由7kbp减少至约4.4kbp，A2和A3结构域通过SQ序列进行连接。删除B结构域的FⅧ不会损失活性，目前已经有多个删除B结构域的重组FⅧ上市（如NUWIQ、ReFacto和XYNTHA），删除B结构域的FⅧ基因还进行了密码子优化，设计了末端反向重复序列（ITRs）、人体肝脏细胞特异性的启动子以及sPA。
1/2期临床试验3年更新结果（BMN-）
BMN-临床试验公布了6x10^13vg/kg和4x10^13vg/kg两个队列的研究数据。6x10^13vg/kg队列的6位患者治疗三年后的平均年化出血率（ABR）从入组前的16.3降至0.7，降幅高达96%，中位年化出血率（ABR）从入组前的16.5降至0，发生出血事件的患者降低86%，所有的患者都不需要进行预防治疗，且实现了目标关节的分辨率。4x10^13vg/kg队列的6位患者2年临床试验也表现出略差的结果。
同时BMN-的临床结果显示ValoctocogeneRoxaparvovec治疗后可以大幅降低FⅧ使用量。6x10^13vg/kg队列研究结果显示3年后患者的平均FⅧ使用量降低96%，中位FⅧ使用量降低%。4x10^13vg/kg队列研究2年的临床试验也表现出略差的结果。
3期临床试验中期结果（GENEr8-1）
GENEr8-1计划在今年3季度完成入组位严重A型血友病患者，本次公布的中期临床研究结果基于16位患者。基于1/2期临床结果（BMN-），ValoctocogeneRoxaparvovec的剂量与疗效关系较大，6x10^13vg/kg表现出更好的结果，因此GENEr8-1采用的剂量为6x10^13vg/kg。治疗5周后，16位患者治疗的平均年化出血率（ABR）从入组前的9.9降至1.5，降幅达到85%且平均FⅧ使用量降低95%。
值得一提的是用不同的检测方法FⅧ活性存在较大差异，FDA最新指导原则也要求血友病基因疗法厂家必须充分考虑该问题。对于删除B结构域的FⅧ基因疗法，一步凝血试验检测的活性大约是显色法检测的1.6倍，经过评估BioMarin选择采用显色法检测FⅧ活性。
安全性
BMN-和GENEr8-1临床研究总体表现出较好的安全性和耐受性，没有出现血栓事件和FⅧ抑制物。与其他靶向肝脏细胞的基因疗法一样，转氨酶升高和注射相关反应为主要的治疗相关不良事件。治疗大约8-16周出现的轻中度转氨酶升高可通过皮质类固醇激素进行控制。
伴随诊断方法
血友病患者存在的AAV中和抗体达到一定滴度后就会影响相同种类AAV载体（载有凝血因子基因）通过血液循环系统运送到转染部位，影响靶部位细胞转染的成功率并最终影响凝血因子的表达水平，因此AAV中和抗体的检测对于患者选择具有重要意义。
FDA在8年7月发布的“人体血友病基因疗法（HumanGeneTherapyforHemophilia）”草案中也强烈建议血友病基因疗法厂家需要同步开发检测AAV中和抗体的伴随诊断方法，并同步申报上市。BioMarin开发了基于MSD平台的电化学发光检测（ECLA）AAV5全抗体（TAb）的伴随诊断方法。
BioMarin通过AAV感染的全球流行病学研究，A型血友病患者AAV5的全球感染率为31%，但感染率和滴度大幅小于AAV2、AAV8和AAVrh10，且AAV感染率随着年龄增大而增加，这些结果与前期的文献调研结果类似，证明AAV5是目前最为可行的血友病基因疗法病毒载体。
小编总结
ValoctocogeneRoxaparvovec是最早进入临床研究的A型血友病基因疗法，通过3年的临床数据证明具有较好的临床效果和良好的安全性，并希望通过人体凝血因子活性作为替代终点寻求加速批准，有望成为首个上市的血友病基因疗法。
在研究过程中，BioMarin与监管机构保持紧密的联系，先后获得孤儿药认证和突破性疗法认证，并根据FDA发布的最新指导原则改进了凝血因子检测方法和同步开发AAV5滴度的伴随诊断方法，为基因疗法的快速申报和上市扫清了法规障碍。ValoctocogeneRoxaparvovec的案例为其他血友病基因疗法研究树立了标杆，期待血友病基因疗法不断进展，造福患者。
参考文献
1.HumanGeneTherapyforHemophilia;DraftGuidanceforIndustry(Draft).July8.
2.血友病治疗在研项目深度解读系列之基因治疗：理想与现实还有多远？Jone.生物制药小编.6-08-22.
