A型血友病基因诊断及送检须知
一、A型血友病简介：
血友病为一种先天性血液凝固异常的遗传疾病，依缺乏的凝血因子种类不同，主要为A型、B型等两类，A型血友病约佔血友病80~85%，致病原因是第八凝血因子(Factor8,简称F8)基因异常，B型血友病约佔15~20%，致病原因是第九凝血因子(Factor9,简称F9)基因异常。血友病患者受伤会有血液不容易凝固的问题，如果发生深部出血时，就可能会有生命的危险。A型血友病的第八凝血因子基因位于染色体Xq28上，属于隐性性联遗传，患者多为男性，需终生注射补充凝血因子。依据第八凝血因子的活性高低，可以区分成轻度(凝血活性5-30%)、中度(凝血活性1-5%)及重度(凝血活性1%)。血友病的严重程度因人而异，轻度血友病患者只有在严重创伤或手术时才会有出血的问题。中度血友病患者较不常出血，也许一个月出血一次，出血通常是遭受创伤，也有部份患者可能自发性出血。重度血友病患者时常会发生肌肉或关节出血，他们可能每个礼拜自发性出血一至二次。
根据国外文献统计，在重度的A型血友病患者中，约有45%的患者其致病原因为F8基因之第22插入子反转突变(Intron22inversion)，5%为第一插入子反转突变(Intron1inversion)，轻度者多属基因单点突变或小片段缺失，目前最常使用的基因诊断方式是以临床确诊的患者搭配双亲及待测者，透过家族连锁方式追踪异常之基因半套体，只是此连锁方式较为间接，且无法明确找出突变的基因点，对于无家族病史的患者或全为同型合子的家族，较难进行相关的遗传诊断，需进一步直接检测患者或带因者是否有常见之Intron22inversion、Intron1inversion、小片段缺失(smalldeletion)、小片段插入(smallinsertion)或单点突变(pointmutation)。
二、 A型血友病的遗传模式：
若父亲正常，母亲为带因者，则每一所生的儿子会有1/2机率为患者，1/2机率为正常；每一所生的女儿会有1/2机率为带因者，1/2机率为正常（模式一）；若父亲为患者，母亲正常，则每一所生的女儿都会是带因者，所生的儿子都是正常（模式二）；若双亲无家族病史，父亲正常且母亲不是带因者，但因为母亲的卵子在分裂时发生新的突变，造成儿子罹病（模式三），此种突变可能只出现于单一卵子，亦有可能出现于一些卵母细胞，所以还是有机会生下患病或带因的小孩。
三、 检体：
a.一般成人：患者、带因者或待测者
种类
检体量
容器
注意事項
全血
3-5c.c.
含EDTA抗凝剂之采血管
避免凝固
b.产前诊断：除胎儿检体外，需同时有胎儿双亲及家族中的男性患者之检体，以供家族基因连锁分析。
种类
檢體量
容器
注意事項
脐带血
2c.c.以上
EDTA管（紫頭）
避免凝固，避免母血污染
絨毛
10mg以上
干净的瓶子或管子，浸泡于生理食盐水或培养液
需确认采样检体为胎儿绒毛组织
羊水
10c.c以上
针头的地方用3M胶布贴紧以防运送过程中脱落
避免母血污染
备注：1.母血或母体组织污染严重之胎儿检体无法检验。
2.所有检体皆应于24小时内以室温保存运送。
一、基因诊断方法、收费及报告时程：
A型血友病的基因诊断主要是检测第八凝血因子基因区域，有否发生常见的突变型，另外可配合家族基因连锁分析法，追踪异常半套体之遗传模式。目前基因诊断可分为以下三个阶段，其内容及收费方式如后：
检验阶段
检验对象
检验费(不包含挂号及采检技术费)
报告时程
第一阶段：常见突变型诊断
F8基因intron22inversion檢測、intron1inversion檢測
(1)临床确定为严重型患者。
(2)患者家族其他成员。
/人
2周
第二阶段：连锁分析或全基因定序
非第一阶段之突变型，进行家族连锁分析检测带因情形或F8基因exon区域(exon1~exon26)直接定序确定基因突变点。
(1)若进行家族连锁分析，需同时检测患者、患者双亲及受测者。
(2)直接定序可检查患者或带因者。
(3)家族内已有确定突变型之患者或带因者，其他家族成员。
(1)患者直接定序:元
(2)基因连锁分析:元/人
(3)已知突变点，检验家族高危险成员带因情形元/人
(4)胎儿产前诊断：元
4周
第三阶段：
若胎儿为男性且以上述方式仍无法确诊时，需于怀孕20周以后抽取胎儿脐带血，检测第八凝血因子活性
。
(1)男性胎儿之产前诊断。
医院之收费标准。
1-2周
※本基因诊断采用分阶段收费方式,先检查常见的突变型,若无法获知明确结果,需进行第二、第三阶段之检查。
五、 基因诊断之局限性：
1. 研究显示，严重型的A型血友病患者约有45%在第八凝血因子基因之Intron22区域产生反转，可利用三组PCR引子进行检测，由于LongDistancePCR产物长达11-12Kb，受限于DNA模板长度及PCR酵素反应效率，可能产生伪阴性之结果。另外5%严重型患者，属于Intron1区域产生反转，利用两组PCR酵素反应，也有可能产生伪阴性之结果。
2. 根据文献报告，A型血友病F8基因之三个基因点位(STR-13、STR-22及BclIRFLP)，在95%的患者家族会出现至少一个异型合子之标记，可供作连锁分析区别对偶基因(Alleles)，但仍有5%之患者家族，三个F8基因标记皆为同型，无法由连锁分析法确知带因与否。
3. 基因直接定序虽可侦测F8基因表现子区域有否发生单点突变、小片段缺失或小片段插入，但无法检出大片段之基因缺失突变。
六、 送检方式：
联系：
