活化部分凝血活酶APTT时间测定

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活化部分凝血活酶时间测定(activeatedpartialthromboplastingtime,APTT),是检测“内源性途径”凝血因子缺陷的过筛试验,也是当前用于凝血因子治疗、肝素抗凝治疗监控以及检测狼疮抗凝物(一种抗磷脂自身抗体)的主要手段,其临床应用频率仅次于PT或与之相当。1原理在抗凝血浆中,加入足量的活化接触因子激活剂和部分凝血活酶(代替血小板的磷脂),再加入适量的钙离子即可满足内源抗凝血的全部条件。从加入钙离子到血浆凝固所需的时间称为活化部分凝血活酶时间。AFTT的长短反映了血浆中内源凝血途径和共同途径中凝血因子的水平。本试验是目前最常用的敏感的检查内源凝血系统是否正常的筛选试验。APTT是从复钙时间和部分凝血活酶时间(PTT)改良而来。它脑磷脂(比PT测定用的凝血活酶少了蛋白质部分,故名部分凝血活酶)作为血小板代替物,加到乏血小板血浆(PPP)中,同时加入了活化第Ⅻ因子的激活剂。较之PTT,其凝固时间缩短,并且排除了血小板数量和功能对血浆凝固的影响。2仪器本测定所用器材、设备(包括采血、贮血容器及加样装置)及要求,与PT完全相同,PT所用自动化仪器同样适用于本试验。3试剂(1)部分凝血活酶试剂现有商品供应,有的已与激活剂按比例配在一起。常用的激活剂有硅藻土(商品名Celite)、白陶土、二氧化硅微粒、鞣花酸(ellagicacid)等,由厂方配套供应。APTT试剂与仪器结合,质量要求为选用Ⅷ、Ⅸ或Ⅺ因子血浆浓度为~U/L(或30%)时敏感的试剂。(2)氯化钙溶液(25mmol/L)及其他试剂与PT所用者相同。4标本采集与处理(1)样品的采取、贮存、运送基本与乏血小板血浆制备和PT测定相同。(2)接触活化时间:加激活剂活化Ⅻ因子的时间要保持一致。各仪器和试剂生产厂家的规定可能不一样,应严格按说明书要求进行。手工操作时,应用秒表或其他定时装置计时。5操作步骤(1)最好用已加有定量枸橼酸钠溶液的专用硅化真空采血管按要求采集静脉血,或静脉采血1.8ml,加入含有mmol/L枸橼酸钠溶液0.2ml的试管中,充分混匀,转/分钟,离心10分钟,分离血浆。(2)试管中加入预温的健康人冻干血浆和APTT试剂各0.1ml,混匀,37℃水浴中预温3分钟并轻轻振摇。



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