著名的“皇家疾病”-血友病（Hemophilia）
欧洲皇族成员流行血友病,缘于近亲结婚
一、血友病的概述
定义：血友病是一组具有遗传性的、凝血功能障碍的出血性疾病。
发病特点：男女均可发病，绝大部分为男性，发病率为1/活产男婴，没有种族差异、区域差别。
临床特点：出血---生之具有，伴随终身。压迫症状及体征---血肿压迫周围神经可致局部疼痛、麻木及肌肉萎缩；压迫血管可致相应供血部位缺血性坏死或淤血、水肿；喉部及颈部出血可致呼吸困难甚至窒息。
防治：血友病至今没有治愈的方法，需通过产前诊断方法避免。
分类：甲型血友病（HA，OMIM，约占80%、X连锁隐性遗传）
乙型血友病（HB，OMIM，约占20%、X连锁隐性遗传）
丙型血友病（HC，OMIM，罕见，常染色体不完全隐性遗传）
临床分型：
分类
轻型
中型
重型
FVIII/FIX:C(%)
5%--40%
1%--≤5%
1%
出血表现
不常见
4–6次/年
24–48次/年
出血原因
大创伤或手术
小创伤
自发性
甲型血友病（致病机制、相关基因、突变类型）
HA是由凝血因子Ⅷ（FⅧ）基因缺陷引起。
FⅧ基因位于Xq28，长约kb，由26个外显子和25个内含子组成。
编码的凝血因子Ⅷ是一种球蛋白（功能部分为Ⅷ：C，抗原部分为Ⅷ：Ag）。
FⅧ基因缺陷造成FⅧ分子合成障碍或功能异常，并引起血液凝固障碍。
HA的遗传基因具有广泛的异质性，自年公布FⅧ基因序列以来，全世界不同种族人群中发现的FⅧ基因突变有多种，其中点突变多种，另外还有缺失、插入、倒位及基因重排等。我国人群中发现的突变超过20种，其中内含子22倒位约占重型HA的50%，其余大多数为点突变，缺失和插入比较少见。
错义突变有：AspGlu，LysThr，ArgCys，AlaThr，AspGlu，TyrCys，ArgCys，LeuPro，ArgGln和ArgHis
无义突变有：ArgStop，TyrStop，ArgStop，ArgStop和ArgStop。
移码突变有：delAT，-insA和-delAGAA。
乙型血友病（致病机制、相关基因、突变类型）
HB是由凝血因子Ⅸ（FⅨ）基因缺陷引起。
FⅨ基因位于Xq27.1-q27.2，长34kb，由8个外显子和7个内含子组成。
FⅨ基因缺陷时同样可导致凝血障碍。
全世界不同种族人群中发现的凝血因子Ⅸ基因的突变有多种，包括点突变，缺失，插入，置换等。突变呈高度异质性，FⅨ基因的CpG岛是一个突变热点。常见的突变类型如下：
错义突变有：Leu27Ser，Cys19Gly，Arg4Gln，Arg4Trp，Glu26Gln，Glu26Gly，Glu33Ala，Val46Ala，Asp49Val，Cys56Tyr，Asp64Tyr，Cys82Ser，Asn92Ser和TyrCys等。
无义突变有：Cys23Stop，Glu27Stop，Arg29Stop，GT，CT和CT等。
移码突变有：delCA，delCA，insT，delA，delC，delT，delG和insT等。
小缺失有：delGlu27，delGlu，delVal，delTTG等。
二、血友病的基因诊断
血友病的基因诊断是指利用分子生物学技术在基因水平上对血友病的基因缺陷进行检测以诊断血友病的一种方法，既可以直接明确患者基因突变类型，又可以用于携带者筛查和产前诊断。主要是血友病凝血因子基因（FⅧ/FⅨ)的序列变异检测，包括基因突变、插入、倒位等的检测。
常用的方法有：
长距离PCR（LD-PCR）
Southern印迹杂交
变性梯度凝胶电泳（DGGE）
DNA测序
短串联重复序列（STR）连锁分析
倒位PCR（IS-PCR）
三.血友病的产前诊断
对于有血友病家族史的家庭来说，通过产前诊断的方法是个有效的降低血友病患儿出生率的途径。
但是仍然有1/3的血友病患儿是新发生的，没有患病家族史，即正常家庭也可能出现血友病患儿。
检测手段：
1、羊水检查
2、B超检查
4、绒毛细胞检查
5、基因诊断
限制因素：
从羊水中获取的胎儿DNA浓度通常较低，而倒位PCR正常进行需要2ug的胎儿DNA。
四.血友病的治疗
替代治疗是目前唯一有效地制止血友病A出血的方法。
所谓替代治疗，就是补充血友病患者所缺乏相应的凝血因子。
辅助止血治疗（DDAVP；抗纤溶药）
物理治疗（有利于关节和肌肉恢复）
基因治疗————（未来实现）根治血友病
治疗原则：
治疗时机越早越好，最好在症状出现2小时以内，不要等体征出现开始治疗。
血友病的基因治疗
原理：
利用载体（病毒，非病毒）将正常基因靶向导入患者体细胞的介质（转染），进行功能表达，纠正遗传性基因缺陷，以持久产生可达止血需要的正常凝血因子，且不刺激产生免疫应答反应。
方法：将血友病致病基因的同源基因导入患者体内，使之持续表达内源性FVIII/IX，治愈血友病。
国内外研究进展：
中国年首次利用逆转录病毒载体将正常人FIX基因cDNA转入HB皮肤成纤维细胞中并获成功表达。
目前，国际上6个组已在36例重型HA/HB体内成功进行了相关凝血因子的表达。
存在的问题：
从原理上讲，基因治疗是消灭遗传病最根本最理想的方法，但由于目前在技术上还有不少难题，比如，机体的免疫反应及对肝脏的伤害作用、病毒容量限制（~5kb）、FVIII表达水平低、易产生抗体等。
五.血友病的预防
一是要注意生育保健，特别是在孕期，应尽量避免接触致畸、致突变的有害因素。
二就是要做血友病的基因检查。
血友病的基因检查大致分为两步。
第一步粗筛，通过婚前检查、遗传咨询等方式了解是否为近亲结婚，家族中有无血友病患者，孕妇是否生过血友病患儿，孕期是否接触过致突变因素等，以决定是否进一步检查。高龄孕妇也应做为重点粗筛对象。
第二步是血友病的基因诊断，即从粗筛出来的可疑对象的血液白细胞中提取DNA，再用基因检测的方法检测其凝血因子基因正常与否。如果胎儿是可疑者，则取羊水细胞或绒毛膜细胞的DNA做检查。
一旦诊断胎儿是血友病患者，应立刻进行选择性流产，以杜绝血友病患儿的出生。而若检测出父(母)亲为致病基因携带者，则可用于指导其婚配和生育。
备注：
我院认可外单位基因检测结果，无需重新筛查，但需要验证致病位点的准确性（点突变，倒位）。
外院患者请选择同时具备开展点突变、倒位、缺失重复医院进行基因筛查，以免（漏检）影响我院的产前诊断进程。
每周一至周五均可进行血友病产前诊断，无需提前预约等待，当天来做可当天返回，每周一、三在郑东院区穿刺，每周二、四、医院区穿刺。
对有生育需求的血友病携带妈妈的常规优生检查流程：
第一步，先检测家族中的血友病患者找到家族的致病基因变异位点，需要患者和患者母亲抽血检测，患者需要来现场抽血，费用3，报告周期1-2月。
第二步，对血友病携带妈妈或者家族中的其他女性定向检测该致病位点，确定是否为携带者，费用或者（倒位），报告周期1-2周。
第三步，对已确诊为血友携带者的孕妇，可选择于孕11-13周抽绒毛、或者孕18-24周抽羊水、或者孕25周抽脐血，进行产前诊断，费用元（绒毛）或者元（羊水/脐血），报告周期1-2周。
血友病相关检测项目要求
及收费标准
——————郑大一附院遗传与产前诊断中心
项目名称
标本类型及采样要求
检测费用
报告时间
血友病A基因诊断
外周血，EDTA抗凝，2ml
3元
4周
血友病B基因诊断
外周血，EDTA抗凝，2ml
元
2周
胎儿羊水产前诊断
（含手术费和基因检测费）
孕17-28周抽羊水
（周一至周五穿刺）
元
2周
胎儿绒毛产前诊断
（含手术费和基因检测费）
孕10-14周取绒毛
（周一至周五穿刺）
元
2周
VIII因子抑制物检测
（含VIII因子活性检测）
空腹采集外周血，柠檬酸钠（9:1）抗凝，3ml
元（抑制物+VIII活性63）
24小时（周六日除外）
预约检查：
无创产前检测网上预约
绒毛穿刺、羊穿门诊及手术网上预约
遗传病基因诊断网上预约
亲子鉴定网上预约
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